ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）試劑盒的原理主要基于抗原與抗體的特異性結(jié)合以及酶的催化作用，通過化學反應(yīng)使底物顯色，然后根據(jù)顏色的深淺來進行定性或定量分析。以下是幾種常見的 ELISA 試劑盒原理類型：
雙抗體夾心法
原理：使用針對抗原不同決定簇的兩種抗體，一種抗體先包被在固相載體（如聚苯乙烯微孔板）表面，用于捕獲抗原，稱為捕獲抗體。加入待檢測樣本后，樣本中的抗原會與固相載體上的捕獲抗體特異性結(jié)合。然后加入另一種標記有酶的抗體，它能與已結(jié)合在捕獲抗體上的抗原的另一個不同表位結(jié)合，形成 “抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 的免疫復(fù)合物。最后加入酶的底物，酶催化底物發(fā)生化學反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化，顏色的深淺與樣本中抗原的含量成正比。
適用范圍：常用于檢測大分子抗原，如蛋白質(zhì)、多肽等，在檢測病原體抗原、腫瘤標志物等方面應(yīng)用廣泛。

間接法
原理：先將抗原包被在固相載體上，然后加入待檢測的含有抗體的樣本，樣本中的抗體與固相載體上的抗原特異性結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入酶標記的抗人或抗動物免疫球蛋白的二抗，二抗與已結(jié)合在抗原上的特異性抗體結(jié)合，形成 “抗原 - 抗體 - 酶標二抗" 的復(fù)合物。加入底物后，酶催化底物顯色，顏色深淺與樣本中抗體的含量相關(guān)。
適用范圍：主要用于檢測各種抗體，如檢測人體血清中的病原體抗體以判斷是否感染過相應(yīng)病原體，或檢測自身抗體用于自身免疫性疾病的診斷等。
競爭法
原理：將特異性抗原和待檢測樣本中的抗體同時加入到已包被有抗體的固相載體中，樣本中的抗體和酶標抗原競爭結(jié)合固相載體上的抗體。如果樣本中抗體含量高，與固相抗體結(jié)合的機會就大，酶標抗原結(jié)合的機會就少；反之，若樣本中抗體含量低，酶標抗原結(jié)合到固相抗體上的機會就多。洗滌后加入底物，酶標抗原與固相抗體結(jié)合得越多，酶催化底物顯色越深，而樣本中抗體的含量與顏色深淺呈反比關(guān)系。
適用范圍：適用于小分子抗原或半抗原的檢測，如檢測藥物殘留、激素等，也可用于檢測抗體效價較低的樣本。
抗原競爭法
原理：先將特異性抗體包被在固相載體上，加入待檢測樣本和一定量的酶標抗原，樣本中的抗原和酶標抗原競爭結(jié)合固相載體上的抗體。經(jīng)過洗滌后，加入底物進行顯色反應(yīng)，樣本中抗原含量越高，與固相抗體結(jié)合的酶標抗原就越少，顏色越淺，即樣本中抗原含量與顏色深淺呈反比。
適用范圍：常用于檢測小分子抗原物質(zhì)，如農(nóng)藥殘留、獸藥殘留等的檢測。